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      c-Kit 基因位于人類染色體 4q12-13 區(qū)域，屬于原癌基因，編碼Ⅲ型激酶受體 CD117，其配體為干細(xì)胞因子（SCF）。該基因通過激活 PI3K、MAPK、JAK-STAT 等信 號(hào)通路，調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、存活及凋亡，在造血干細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、生殖細(xì)胞等發(fā) 育中起關(guān)鍵作用，并參與胚胎發(fā)育、配子形成及免疫細(xì)胞功能。

      c-Kit 異常激活與多種腫瘤相關(guān)，如 80%的胃腸道間質(zhì)瘤（GIST）存在 c-Kit 突變，常 見于 11 號(hào)外顯子（如 K642E 突變），導(dǎo)致受體持續(xù)活化，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)；此外，急性髓 系白血病、黑色素瘤、肥大細(xì)胞增生癥等也可見其突變。靶向藥物如可抑制異常 c-Kit 活性，改善患者預(yù)后，尤其在 GIST 中療效顯著。

      在正常生理中，c-Kit 還參與維持組織干細(xì)胞功能及生育能力。其功能缺失突變則可能 引發(fā)斑駁癥等遺傳性疾病。當(dāng)前，c-Kit 仍是癌癥靶向治療的重要靶點(diǎn)，相關(guān)藥物研發(fā)持續(xù) 推進(jìn)，以優(yōu)效并克服耐藥性。

      BaF3（小鼠原 B 細(xì)胞）的生長(zhǎng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達(dá)激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅(qū)動(dòng)基因，讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖，進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅(qū)動(dòng)基因，用于評(píng)估小分子藥物對(duì)激酶的靶向抑制作用，原理及流程見下圖所示。
 

Figure 1. c-Kit[D816V] BaF3 細(xì)胞的構(gòu)建原理圖

1.WB of  c-Kit D816V/BaF3

Figure 2. WB of c-Kit D816V/BaF3

2. Sanger of c-Kit D816V/BaF3

 Figure 3. Sanger of c-Kit D816V/BaF3

3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of  c-Kit [D816V] BaF3 (C1).